La piccola chiesa di Santo Spirito è situata lungo la via Bramante dell’allora quartiere di Santa Lucia. Dei documenti danno risalire l’origine della Chiesa al 1554, anch se una congregazione dello Spirito Santo esisteva fin dal 1398. La facciata eserna è composta da un frontone triangolare mentre due semplici pilastri laterali delimitano una grande finestra sormontata da putti. L'interno è ad aula unica rettangolare ed il tesoro di questa piccola chiesa è costituita dalla volte a botte, divisa in quindici riquadri che rappresentano i quattro profetied i sette doni dello Spirito Santo. Alle pareti troviamo quattordici tele raffiguranti la Vergine, la Maddalena e gli apostoli forse del Cialdieri. Dietro l’altare maggiore trionfa una splendida Pentecoste, opera forse attribuita a Federico Zucca. Ai lati di questo altare si trovavano due tele "La Crocifissione e la Pentecoste" di Luca Signorelli ora esposte nella Galleria Nazionale delle Marche.
 
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